2025-09-09 11:07:43
英瀚斯生物深入了解客戶的具體需求,并制定了經(jīng)過(guò)測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),以優(yōu)化免疫組化實(shí)驗(yàn)的各個(gè)方面,包括組織固定方法、抗原活化條件、抗體滴度選擇、孵育時(shí)間和洗滌條件等。組織切片的制備:客戶可以提供新鮮組織,由我們負(fù)責(zé)進(jìn)行組織固定和石蠟包埋;也可以提供冷凍或石蠟包埋的組織或細(xì)胞樣品進(jìn)行分析。抗體的選擇:客戶可以自行提供檢測(cè)所需的一抗,或者由我們從現(xiàn)有的抗體中篩選合適的抗體。檢測(cè)所需的二抗由我們提供。特殊染色技術(shù)用于檢測(cè)特定細(xì)胞成分。南京TTC染色公司
?病理染色流程之組織脫水:樣品經(jīng)過(guò)固定后,將通過(guò)一系列的酒精梯度逐步脫水,然后用二甲苯透明化,***浸入石蠟中。這一系列步驟旨在去除組織中的水分,使其變得堅(jiān)硬并易于切片。?石蠟包埋區(qū):脫水后的組織被包裹在石蠟中,形成一個(gè)堅(jiān)硬的塊狀物,便于后續(xù)的切片操作。?切片制作區(qū):使用石蠟切片機(jī)(如Leica HistoCore MULTICUT)將包埋好的組織切成薄片(通常為4-5微米厚),以便于進(jìn)一步的染色和觀察。
英瀚斯專業(yè)病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái),從取材固定包埋脫水切片染色拍照分析,一站式完成。 南京番紅-固綠染色外包剛果紅染色用于檢測(cè)淀粉樣蛋白沉積。
常見(jiàn)染色方法有:蘇木精-伊紅染色(H&E染色)?用途:是**常用的組織學(xué)染色方法,適用于幾乎所有類型的組織。?結(jié)果:細(xì)胞核被蘇木精染成藍(lán)色或紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染成粉紅色。Masson三色染色?用途:用于顯示膠原纖維、肌纖維和細(xì)胞核。?結(jié)果:膠原纖維呈藍(lán)色,肌纖維呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)黑色。天狼星紅染色?用途:用于顯示膠原纖維,在偏振光下區(qū)分不同類型的膠原纖維。?結(jié)果:I型膠原纖維呈亮黃色或橙紅色,III型膠原纖維呈綠色或黃色。PAS染色(過(guò)碘酸雪夫染色)?用途:用于檢測(cè)糖原和其他多糖物質(zhì)。?結(jié)果:糖原和其他多糖物質(zhì)呈紫紅色或粉紅色。銀染技術(shù)?用途:用于顯示神經(jīng)纖維、網(wǎng)狀纖維等。?結(jié)果:神經(jīng)纖維和網(wǎng)狀纖維呈黑色或深棕色。免疫組化染色?用途:用于檢測(cè)和定位特定的蛋白質(zhì)或抗原。?結(jié)果:特定的蛋白質(zhì)或抗原被標(biāo)記并顯現(xiàn)出特定的顏色。
2. 病變特征的識(shí)別:?通過(guò)特定的染色方法,可以識(shí)別出不同類型的病變特征。例如,Masson三色染色可以區(qū)分膠原纖維(藍(lán)色)、肌纖維(紅色)和細(xì)胞核(藍(lán)黑色),這對(duì)于評(píng)估心肌梗死、肺纖維化、肝纖維化等疾病模型中的纖維化程度非常有用。3. 炎癥反應(yīng)的評(píng)估:?某些染色方法可以用來(lái)檢測(cè)炎癥反應(yīng)。例如,PAS(過(guò)碘酸雪夫染色)可以顯示糖原和其他多糖物質(zhì),有助于評(píng)估炎癥過(guò)程中糖原的沉積情況。4. 細(xì)胞增殖和凋亡的分析:?免疫組化染色如Ki-67染色可以用來(lái)標(biāo)記增殖細(xì)胞,TUNEL染色可以用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。這些染色方法對(duì)于評(píng)估**模型或其他涉及細(xì)胞增殖和死亡的模型非常重要。TUNEL染色用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡。
TUNEL染色的染色步驟1. 樣品準(zhǔn)備:?將組織切片或細(xì)胞固定在載玻片上,通常使用4%多聚甲醛或其他固定劑。?進(jìn)行蛋白酶K處理,以增加細(xì)胞膜的通透性,使TdT能夠進(jìn)入細(xì)胞并接觸DNA。2. TUNEL反應(yīng):?準(zhǔn)備TUNEL反應(yīng)混合液,包括TdT酶和標(biāo)記的dUTP(如熒光素或生物素標(biāo)記的dUTP)。?將反應(yīng)混合液滴加到樣品上,在適當(dāng)?shù)臏囟认路跤欢〞r(shí)間(通常為1小時(shí)左右)。3. 洗滌:?用PBS緩沖液或其他適當(dāng)?shù)南礈煲呵逑礃悠罚コ唇Y(jié)合的dUTP。4. 信號(hào)檢測(cè):?如果使用的是熒光素標(biāo)記的dUTP,可以直接在熒光顯微鏡下觀察。?如果使用的是生物素標(biāo)記的dUTP,則需要進(jìn)一步與鏈霉親和素-熒光素復(fù)合物或其他顯色試劑結(jié)合,然后在顯微鏡下觀察。Nissl染色用于顯示神經(jīng)元的尼氏體。南京Warthin-Starry銀染色外包
病理染色切片用于顯微鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)。南京TTC染色公司
病理切片染色實(shí)驗(yàn)的可靠性依賴于嚴(yán)格的質(zhì)量控制。研究人員應(yīng)當(dāng)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照,以驗(yàn)證染色的特異性和可靠性。陽(yáng)性對(duì)照是已知表達(dá)目標(biāo)抗原的組織,陰性對(duì)照則是省略一抗或使用同型對(duì)照抗體的切片。此外,重復(fù)性檢測(cè)和標(biāo)準(zhǔn)化操作也十分關(guān)鍵。尤其在臨床病理中,染色結(jié)果直接影響診斷,因此必須有統(tǒng)一的操作規(guī)范和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。例如,IHC 中的 HER2 染色評(píng)分就是基于統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的,以保證結(jié)果的可比性和臨床應(yīng)用價(jià)值。專業(yè)病理切片染色拍照平臺(tái)。南京TTC染色公司